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麻疯树pepc基因正义、反义植物表达载体构建与功能初步分析

范正琪 卢孟柱 李纪元 田敏 李辛雷 吴开云 陈东亮 范妙华

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麻疯树pepc基因正义、反义植物表达载体构建与功能初步分析

  • 基金项目:

    浙江省重大科技专项重点项目"林源植物脂肪酸合成酶基因工程菌株的开发利用"(2006C12030)

  • 中图分类号: S718.46

Constructing of Sense and Antisense pepc Expression Vector of Jatropha curcas and the Transformation

  • CLC number: S718.46

  • 摘要: 根据麻疯树pepc基因和植物表达载体的酶切位点特征,分别将pepc基因全长序列3 000 bp正向插入pCAMBIA2300,构建了正义表达载体pCAMBIA-Jcpepc,基因片段597 bp反向插入pBI121构建了反义表达载体pBI-Jcpepc。通过农杆菌介导,采用叶盘法转化烟草,通过对转基因植株的PCR和PCR-Southern检测,表明pepc基因已经正向、反向插入烟草基因组中。测定了转基因烟草的PEPCase酶活性,并通过脂肪酸的测定,转正义pepc基因烟草叶片的脂肪酸含量平均比对照降低44.3%,转反义pepc基因植株脂肪酸含量平均比对照增加26.3%。
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出版历程
  • 收稿日期:  2010-03-19

麻疯树pepc基因正义、反义植物表达载体构建与功能初步分析

  • 1. 中国林业科学研究院亚热带林业研究所,浙江 富阳 311400
  • 2. 中国林业科学研究院林业研究所,北京 100091
基金项目:  浙江省重大科技专项重点项目"林源植物脂肪酸合成酶基因工程菌株的开发利用"(2006C12030)

摘要: 根据麻疯树pepc基因和植物表达载体的酶切位点特征,分别将pepc基因全长序列3 000 bp正向插入pCAMBIA2300,构建了正义表达载体pCAMBIA-Jcpepc,基因片段597 bp反向插入pBI121构建了反义表达载体pBI-Jcpepc。通过农杆菌介导,采用叶盘法转化烟草,通过对转基因植株的PCR和PCR-Southern检测,表明pepc基因已经正向、反向插入烟草基因组中。测定了转基因烟草的PEPCase酶活性,并通过脂肪酸的测定,转正义pepc基因烟草叶片的脂肪酸含量平均比对照降低44.3%,转反义pepc基因植株脂肪酸含量平均比对照增加26.3%。

English Abstract

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