香石竹ACC氧化酶基因的克隆与植物表达载体构建

余义勋; 张俊卫; 孙振元; 包满珠

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香石竹ACC氧化酶基因的克隆与植物表达载体构建

余义勋 , 张俊卫 , 孙振元 , 包满珠

文章导航 > 林业科学研究 > 2002 > 15(3): 256-260

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Citation:

香石竹ACC氧化酶基因的克隆与植物表达载体构建

1.
华中农业大学林学系,武汉430070
2.
中国林业科学研究院花卉中心,北京100093
基金项目:
国家自然科学基金(39970532);948项目(960406)资助
中图分类号: S722.3

Cloning of ACC Oxidase Gene of Carnation and Construction of Its Plant Expression Vectors

1.
Central China Agricultural University, Wuhan 430070, Hubei, China
2.
Flower Center, CAF, Beijing 100091, China
CLC number: S722.3

摘要: 根据已发表的ACO核苷酸序列,设计一对引物,以香石竹品种'American'基因组DNA为模板,扩增出香石竹ACC氧化酶基因,将其连接到pMD18加T质粒载体上,通过中间载体pBluescriptSK,构建了ACO基因正向和反向插入的植物表达载体,并将其导入了农杆菌。
- 香石竹
- / ACC氧化酶
- / 基因克隆
- / 测序
- / 重组载体构建
Abstract: A pair of primers were designed according to the 1 aminocyclopropone 1 carboxylic acid (ACC) oxidase gene of carnation and the primers were used to amplify the genomic DNA fragment of about 1.2 kb by polymerase chain reaction (PCR)by taking genome DNA from 'American' carnation leaves as template. The PCR product was cloned into T tailing pMD18 vector. Sequencing indicated that the ACC oxidase gene included three exons interrupted by 2 introns with identical positions as they are in tomato. ACC oxidase gene were respectively cloned into plant expression vector pMOGMON in sense and antisense orientation. Recombinant expression vectors were identified by restriction enzyme and PCR analysis. PCR indicated plant expression vectors were transferred into A. tumefaciens.
- carnation ( Dianthus caryophus L.)
- / ACC oxidase gene
- / cloning
- / sequencing
- / construction of plant expression vector

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