桤木群体遗传分化研究I.DNA提取和PCR条件的建立

卓仁英; 孟现东; 陈益泰

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桤木群体遗传分化研究I.DNA提取和PCR条件的建立

卓仁英 , 孟现东 , 陈益泰

文章导航 > 林业科学研究 > 2003 > 16(1): 117-122

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桤木群体遗传分化研究I.DNA提取和PCR条件的建立

1.
中国林业科学研究院亚热带林业研究所,浙江富阳 311400
基金项目:
2002-2004年浙江省自然科学基金项目"桤木属植物系统生物学及群体结构遗传研究"(编号301265)
中图分类号: S792.14

Research on the Populations Variation of Alnus cremastogyneI. DNA Extracting and Protocol Optimum for PCR

1.
Research Institute of Subtropical Forestry, CAF, Fuyang311400, Zhejiang, China
CLC number: S792.14

摘要: 桤木(Alnus cremastogyne Burk)为桦木科(Betulaceae)植物,主要分布于四川盆地及其周边地区。桤木喜光、喜湿,根系发达,对土壤要求不严,适应性强,在长江中下游地区防护林建设中具有重要作用。
- 桤木
- / RAPD分子标记
- / PCR扩增条件
Abstract: Taking China's endemic tree species Alnus cremastogyne and other 5 Alnus species as test materials, the DNA extraction of genome and the amplification of PCR were studied. Two methods were tested, i.e. freezing treatment+5% CTAB and liquid nityrogen+5% CTAB. It is proved that the optimum PCR program is as follows: pre denaturating under 94 ℃ for 3 min., denaturating under 94 ℃ for 18 seconds, annealing under 36 ℃ for 80 seconds and extending under 72 ℃ for 120 seconds. After 40 cycles, the sample is reacted for 10 minutes under 72 ℃. PCR system includes buffer 2.5 μL, d NTP 2.5 μL, primer (s60+s155) 2 mmol·L -1, Mg2+ 3.0 mmol·L -1, Tap enzyme 1 U, DNA 40 mg, then adding ddH2O to 20 μL. This study may provide some references for the application of RAPD technique in genetic research of alder tree species.
- Alnus cremastogyne
- / RAPD molecular marker
- / PCR

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