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麻竹RAPD反应条件的优化

邢新婷 ,  傅懋毅

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文章导航 > 林业科学研究  > 2003 >  16(5): 554-559
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shu
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shu

麻竹RAPD反应条件的优化

  • 1.

    中国林业科学研究院亚热带林业研究所,浙江富阳 311400

  • 基金项目:

    国家林业部指南项目"竹类植物遗传多样性研究和遗传连锁图谱的构建"(项目编号190)

  • 中图分类号: S795.9

Study on the Optimization of RAPD Conditions of Dendrocalamus latiflorus Munro

  • 1.

    Research Institute of Subtropical Forestry, CAF, Fuyang311400, Zhejiang, China

  • CLC number: S795.9

  • 摘要: 以麻竹DNA为模板,对影响麻竹RAPD扩增的重要参数进行了优化试验,以期建立麻竹RAPD反应的最适体系。最终得出的麻竹RAPD反应体系为:20μL反应体系,2μL10倍反应缓冲液,模板含量为50ng,2.5mmol·L-1的Mg2+,1.5U的Taq酶,dNTP为1.75mmol·L-1,引物浓度为0.4μmol·L-1。优化后的RAPD反应程序为:94℃3min→[94℃1min→37 5℃1min→72℃1min20sec]40个循环→72℃8min→4℃保持。
    Abstract: Based on the genomic DNA of Dendrocalamus latiflorus,some essential factors that might affect the results of RAPD were compared and the optimal RAPD reaction system for D.latiflorus was established.The optimized condition for 20 μL reaction system were 2 μL 10 diploid buffer, 50 ng template DNA, 2. 5 mmol·L-1 MgCl2,1. 5 U Taq DNA polymerase, 1. 75 mmol·L-1 dNTP and 0. 4 μmol·L-1 Random primer.The optimized reaction program was initially at 94 ℃ for 3 min, followed by 40 cycles at 94 ℃ for 1 min, at 37. 5 ℃ for 1 min, at 72 ℃ for 1 min 20 sec, and then held at 72 ℃ for 8 min,and finally kept at 4 ℃.
  • [1] 邢新婷 , 傅懋毅 , 费学谦 , 姜景民 . 撑篙竹遗传变异的RAPD分析. 林业科学研究, 2003, 16(6): 655-660.
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出版历程
  • 收稿日期:  2002-12-19

麻竹RAPD反应条件的优化

  • 1. 中国林业科学研究院亚热带林业研究所,浙江富阳 311400
  • 收稿日期: 2002-12-19
基金项目:  国家林业部指南项目"竹类植物遗传多样性研究和遗传连锁图谱的构建"(项目编号190)

摘要: 以麻竹DNA为模板,对影响麻竹RAPD扩增的重要参数进行了优化试验,以期建立麻竹RAPD反应的最适体系。最终得出的麻竹RAPD反应体系为:20μL反应体系,2μL10倍反应缓冲液,模板含量为50ng,2.5mmol·L-1的Mg2+,1.5U的Taq酶,dNTP为1.75mmol·L-1,引物浓度为0.4μmol·L-1。优化后的RAPD反应程序为:94℃3min→[94℃1min→37 5℃1min→72℃1min20sec]40个循环→72℃8min→4℃保持。

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