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免疫磁性捕获ELISA技术在松材线虫检测中的应用

曹宇 ,  李海燕 ,  马洪周 ,  胡加付 ,  杨文博 ,  王玉嬿 ,  白钢

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文章导航 > 林业科学研究  > 2005 >  18(5): 585-589
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shu
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shu

免疫磁性捕获ELISA技术在松材线虫检测中的应用

  • 1.

    南开大学生命科学学院,天津300071

  • 2.

    国家林业局森林病虫害防治总站,辽宁沈阳110034

  • 基金项目:

    国家“十五”重点科技攻关子项目“林业重大病虫害预警及控制技术研究”中的专题

  • 中图分类号: S763.1

Development and Application of Immunomagnetic Separation ELISA for Identification of Bursaphelenchus xylophilus in Pinewood

  • 1.

    College of Life Science,Nankai University,Tianjin 300071,China

  • 2.

    General Station of Forest Pest Management,State Forestry Administration,Shenyang 110034,Liaoning,China

  • CLC number: S763.1

  • 摘要: 本研究采用种子聚合法合成聚苯乙烯磁性微球,并以兔抗松材线虫IgG致敏,制备出能特异性地捕获松材线虫蛋白抗原的免疫磁性微球。以生物素标记抗体为示踪抗体,并结合酶标亲和素检测系统,用于疫木样品的分析。利用该方法对采自不同地区的3种松树,其中松材线虫病木17株、拟松材线虫病木5株和健木3株进行检测。实验结果表明,虽然拟松材线虫病木也呈现了一定的交叉反应,但疫木中松材线虫总检出率为94.1%,灵敏度达到0.1μg.mL-1线虫蛋白抗原。研究表明免疫磁性捕获ELISA技术可直接捕获木屑中的微量线虫抗原,具有简便、快速、准确等优点,是一种实用的松材线虫的快速检疫方法。
    Abstract: Using dispersion polymerization,polystyrene magnetic micropsheres as carriers were prepared.By coating with rabbit anti-Bursaphelenchus xylophilus(BX) IgG,the immunomagnetic microspheres(IMMS) could specifically capture nematode antigen on pinewood samples.Taking biotinylated Anti-BX rabbit IgG as a tracer antibody,together with horseradish peroxidase labeled avidin,an enzyme-linked immuosorbent assay(ELISA) on IMMS was developed.Three kinds of pine trees harvested from different areas were detected by this method.Although there were a few crossed reactivity between Bursaphelenchus mucronatus antigen with Anti-BX IgG,the relevance ratio of BX on infected pine trees was 94.1% and the detection limit could be 0.1 μg·mL-1 nematode antigen.The result suggested that immunomagnetic separation enzyme-linked immuosorbent assay(IMS-ELISA) could directly capture trace nematode antigen on pinewood homogenizations.The method showed practicability of the quick quarantine inspection for its speediness,convenience and accuracy.
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出版历程
  • 收稿日期:  2004-01-17

免疫磁性捕获ELISA技术在松材线虫检测中的应用

  • 1. 南开大学生命科学学院,天津300071
  • 2. 国家林业局森林病虫害防治总站,辽宁沈阳110034
  • 收稿日期: 2004-01-17
基金项目:  国家“十五”重点科技攻关子项目“林业重大病虫害预警及控制技术研究”中的专题

摘要: 本研究采用种子聚合法合成聚苯乙烯磁性微球,并以兔抗松材线虫IgG致敏,制备出能特异性地捕获松材线虫蛋白抗原的免疫磁性微球。以生物素标记抗体为示踪抗体,并结合酶标亲和素检测系统,用于疫木样品的分析。利用该方法对采自不同地区的3种松树,其中松材线虫病木17株、拟松材线虫病木5株和健木3株进行检测。实验结果表明,虽然拟松材线虫病木也呈现了一定的交叉反应,但疫木中松材线虫总检出率为94.1%,灵敏度达到0.1μg.mL-1线虫蛋白抗原。研究表明免疫磁性捕获ELISA技术可直接捕获木屑中的微量线虫抗原,具有简便、快速、准确等优点,是一种实用的松材线虫的快速检疫方法。

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