影响聊红槐离体叶片再生因子的研究
Study on the Factors Affecting the Regeneration ofin vitro Leaves of Sophora japonica f. 'L iao Hong'
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摘要: 蔗糖浓度对聊红槐试管苗的增殖倍数的影响较小, 但影响试管苗的生长形态, 在WPM 培养基中蔗糖浓度由原来20 g? L-1增加到60 g? L-1时, 叶片由皱褶变为正常, 颜色变为深绿。经过以下培养程序可以建立叶片再生体: 将聊红槐增殖分化苗接种于WPM (附加6-BA 2. 0 m g? L-1 + NAA 0. 05 mg ? L-1 + 蔗糖20~ 60 g? L-1 + 琼脂7. 0 g? L-1 )上, 继代培养20 d, 获得分化型试管苗; 剪取叶片投入1 mg? L-1V c无菌水浸泡1~ 3 m in, 接入W PM( 附加6-BA 2. 0 m g? L-1 + NAA 0. 1 mg? L-1 + 蔗糖40 g? L-1 + 琼脂7. 0 g? L-1 )上, 光照培养30~ 40 d, 获得剪切口组织脱分化; 环境控制( 光照时间12 h, 暗培养12 h, 光强2 000 1x, 温度25 ; 黑暗温度15 , pH 值5. 8)下培养20~ 30 d, 诱导出绿色愈伤组织; 转接WPM 培养基( 附加6-BA 4. 0 m g? L-1 + NAA 0. 05 mg? L-1 + GA 2 m g?L-1 + 蔗糖60 g? L-1 + 琼脂7. 0 g? L-1 )上, 培养后由绿色愈伤组织萌发出不定芽, 再生不定芽率为89%。Abstract: The propagationa l mu ltiple o f Sophora japonica .f ‘L iao Hong’ tube seedlings w as less affected by theconcentration o f sucrose, but the concentration o f sucrose affected the grow th morpho logy o f tube seed lings. Whenthe sucrose concentration increased from 20 g? L-1 to 60 g? L-1 inWPM m edia, the leaves turned to norma l fromcrink led and became dark g reen. The procedures of leave regenerat ion cu lture are as fo llow s: The d ifferentiatedseedlings o fS. jap onica w ere inocu lated onWPM ( w ith 6- BA 2. 0mg? L-1 + NAA 0. 05mg? L-1 + sucrose 20~60 g? L-1 + agar 70 g? L-1 ) , after cu ltured for 20 days, the d ifferent iated tube seed lings w ere obta ined. Theleaves sheared w ere put into asepsis w aterw ith 1mg? L-1 V itam in C and soaked for 1~ 3m inutes, then planted ontoWPM ( w ith 6- BA 2. 0mg? L-1 + NAA 0. 1 mg? L-1 + sucrose 40 g? L-1 + agar 7. 0 g? L-1 ) , and culturedunder illum ination for 30~ 40 days, the differentiated cutt ing tissues w ere go.t Cultured under contro lled env ironment ( illum ination tim e 12 hours, dark culture for 12 hours, light intensity 2 000 lx, temperature 25 , dark cu lture tempera ture 15 , pH 5. 8) for 20~ 30 days, the green callus were induced; then they w ere transplan ted onWPM med ia (w ith 6- BA 4. 0mg? L-1 + NAA 0. 05mg? L-1 + GA 2mg? L-1 + sucrose 60 g? L-1 + agar 7?0 g? L-1 ) , the adventitious budsw ere germ inated from green callus t issues, and the regenerated adventitious buds ra tew as 89% .
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Key words:
- affect ing facto rs
- / Sophora japonica .f 'LiaoH ong'
- / leave
- / regeneration
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