落叶松扦插生根过程抑制消减杂交文库构建及分析

冯健; 齐力旺; 孙晓梅; 韩素英; 张守攻

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落叶松扦插生根过程抑制消减杂交文库构建及分析

冯健 , 齐力旺 , 孙晓梅 , 韩素英 , 张守攻

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落叶松扦插生根过程抑制消减杂交文库构建及分析

1.
中国林业科学研究院林业研究所细胞生物学实验室, 北京 100091
2.
辽宁林业科学研究院, 辽宁沈阳 110032
3.
中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所, 北京 100091
基金项目:
国家“863” 计划“高产优质多抗林木花草分子与细胞高效育种技术及品种创制( 2006AA100109 )”和国家转基因与产业化专项“优质、杂种落叶松抗旱基因工程育种研究( J2002-B-005)”

Construction and Analysis of the Suppression SubtractiveHybridization L ibrary of Larix Cuttings during Rooting

1.
Group of Trees Cell Biology, Research Inst itu te of Forestry, CAF, Beijing 100091, Ch ina
2.
Liaon ing A cad emy of Forestry,Shenyang 110032, L iaon ing, Ch ina
3.
Research Inst itu te o fForest Eco logy, Environment and Protect ion, CAF, Beijing 100091, Ch ina

摘要: 以落叶松扦插生根率存在显著差异的2个全同胞优良无性系茎和根为材料, 应用抑制消减杂交技术构建了扦插生根过程中2个差异表达cDNA 文库, 酶切效率检测、连接效率检测、差减效率检测结果表明: 这2个落叶松扦插生根过程差异表达cDNA 文库构建成功。利用PCR扩增和点杂交试验筛选阳性克隆, 将阳性克隆测序, 并经生物信息学分析, 最终获得521个Un iEST。
- 落叶松
- / 抑制消减杂交文库
- / 扦插
Abstract: Taking the stem s and roots of tw o fu ll sib clones w ith significant d ifference in roo ting rate as testmaterials, tw o differential expression cDNA librar ies o f Larix cutting during root ing w ere established by PCR se lectTM cDNA subtract ion k i.t The resu lts of analysis of Rsa I d igest ion, ligat ion and subtraction eff iciency show edtha t the tw o libraries w ere established successfully. The posit ive clones w ere screened by PCR and dot blots. 521UniEST w ere obta ined by sequenc ing and b io informat ics ana lysis.
- Larix
- / suppression subtract ive hybrid izat ion library
- / cutting

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落叶松扦插生根过程抑制消减杂交文库构建及分析

1. 中国林业科学研究院林业研究所细胞生物学实验室, 北京 100091
2. 辽宁林业科学研究院, 辽宁沈阳 110032
3. 中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所, 北京 100091

收稿日期: 2008-03-07

基金项目: 国家“863” 计划“高产优质多抗林木花草分子与细胞高效育种技术及品种创制( 2006AA100109 )”和国家转基因与产业化专项“优质、杂种落叶松抗旱基因工程育种研究( J2002-B-005)”

关键词:

摘要: 以落叶松扦插生根率存在显著差异的2个全同胞优良无性系茎和根为材料, 应用抑制消减杂交技术构建了扦插生根过程中2个差异表达cDNA 文库, 酶切效率检测、连接效率检测、差减效率检测结果表明: 这2个落叶松扦插生根过程差异表达cDNA 文库构建成功。利用PCR扩增和点杂交试验筛选阳性克隆, 将阳性克隆测序, 并经生物信息学分析, 最终获得521个Un iEST。