根癌农杆菌介导的反义VeFAD2基因对少根根霉的遗传转化及其影响因子

刘明靖; 李纪元; 范正琪; 田敏; 范妙华

留言板

尊敬的读者、作者、审稿人, 关于本刊的投稿、审稿、编辑和出版的任何问题, 您可以本页添加留言。我们将尽快给您答复。谢谢您的支持!

姓名
邮箱
手机号码
标题
留言内容
验证码

根癌农杆菌介导的反义VeFAD2基因对少根根霉的遗传转化及其影响因子

刘明靖 , 李纪元 , 范正琪 , 田敏 , 范妙华

文章导航 > 林业科学研究 > 2010 > 23(4): 592-596

引用本文:

Citation:

根癌农杆菌介导的反义VeFAD2基因对少根根霉的遗传转化及其影响因子

1.
中国林业科学研究院亚热带林业研究所,浙江富阳 311400
基金项目:
浙江省科技厅重大项目(2006C12030;2005C12003)

Genetic Transformation in Rhizopus arrhizus of Antisense VeFAD2 Gene via Agrobacterium tumefaciens-mediated Transformation and Its Influencing Factors

1.
Research Institute of Subtropical Forestry, Chinese Academy of Forestry, Fuyang 311400, Zhejiang, China

- AtMT
- / VeFAD₂基因
- / 遗传转化
- / 少根根霉
Abstract: Agrobacteriurn tumefaciens-mediated transformation (AtMT) method was used to study the genetic transformation in Rhizopus arrhizus of antisense expression vector pBI121-fad2 of VeFAD2 gene. We studied the key factors influencing transformation, such as A.tumefaciens strains,bacterial cell volume initially used, co-cultivation time, effective period and concentration of AS. The results shows that the ideal A.tumefaciens strain is AGL-1, the optimum bacterial cell volume initially used is 50-100 μL and co-culture 24 hours will get the most transformants. At co-culture period, AS induction is indispensable. It is beneficial to improve transformation ratio by adding to 200 μmol·L-1 AS at preincubate period and increasing AS concentration to 400-600 μmol·L-1 at co-culture period. It determined that antisense VeFAD2 gene has been integrated into the genome of R. arrhizus by PCR-Southern detection.
- AtMT
- / VeFAD₂ gene
- / genetic transformation
- / Rhizopus arrhizus

[1]	范妙华,李纪元,范正琪. 植物脂肪酸脱饱和酶特性及转基因研究进展[J]. 生物技术通报,2007(6):16-20
[2]	Harrington K J. Chemical and physical properties of vegetable oil esters and their effect on diesel fuel performance[J]. Biomass,1986,9(1):1-17
[3]	Kaieda M, Samukawa T, Kondo A, et al. Effect of methanol and water contents on productions on production of biodiesel fule from plant oil catalyzed by various lipases in a solvent-free system[J]. Biosci, 2001,91(1):12-15
[4]	Gerpen J V. Business management for biodiesel producers . Golden: National Renewable Energy Laboratory, 2004
[5]	Bundock P, den Dulk-Ras A, Beijersbergen A,et al.Trans-kingdom T-DNA transfer from Agrobacterium tumefaeiens to Saccharomyces cerevisiae[J]. The EMBO Journal,1995,14(3):3206-3214
[6]	Gouka R J,Gerk C,Hooykaas P J J,et al. Transformation of Aspergillus awarnori by Agrobacterium tumefaciens-mediated homologous recombition[J]. Nature Biotechnology,1999,17:598-601
[7]	迟彦,周东坡,平文祥,等. 根癌农杆菌介导的真菌遗传转化及其应用[J]. 菌物学报,2005,24(4):612-619
[8]	李娟,杨金奎,梁连铭,等. 丝状真菌遗传转化系统研究进展[J]. 江西农业大学学报,2006,28(4):516-520
[9]	Michielse C B,Salim K,Ragas P,et al. Development of a system for integrative and stable transformation of the zygomycete Rhizopus oryzae by Agrobacterium-mediated DNA transfer[J]. Mol Gen Genomics,2004,271:499-510
[10]	黄亚丽,潘玮,蒋细良,等. 根癌农杆菌介导丝状真菌遗传转化的研究进展[J].生物技术通报,2007(3):111-114
[11]	杨长得,刘刚,郑易之,等. 根癌农杆菌在丝状真菌转化中的应用[J].生物技术通讯,2006,17(5):784-787
[12]	张莉莉,张苓花,史剑斐,等. 利用氯化苄提取真菌基因组DNA及其分子生物学分析[J].大连轻工业学院学报,2000,19(1):36-39
[13]	李国田,杨合同,周红资,等. 根癌农杆菌介导的木霉插入转化及其应用[J].山东科学,2006,19(6):24-30
[14]	Campoy S,Perez F, Martin J F,et al.Stable transformants of the azaphilone pigment-producing Monascus purpureus obtained by protoplast transformation and Agrobacterium-mediated DNA transfer[J]. Current Genet , 2003,43(6):447-452
[15]	高兴喜,杨谦,郭兆奎,等. 影响根癌农杆菌介导的木霉菌遗传转化因素分析[J]. 微生物学通报,2005,32(1):74-78
[16]	龙朝钦,邓军,郝飞,等. 根癌农杆菌介导的烟曲霉转化条件的优化[J].西部医学,2008,20(2):261-264
[17]	Mullins E D,Chen X,Romaine P,et al. Agrobaeterium-mediated transformation of Fusarium oxysporum:an efficient tool for insertional mutagenesis and gene transfer[J]. Phytopathology,2001,91:173-180
[18]	Zeilinger S. Gene disruption in Trichoderma atroviride via Agrobacterium-mediated transformation[J]. Current Genet, 2004,45(1):54-60
[19]	de Groot M J,Bundock P,Hooykaas P J J,et al. Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation of filamentous fungi[J]. Nature Biotechnology, 1998,16(9):839-842

[1]	许锋 , 朱俊 , 张风霞 , 王燕 , 程水源 , 程述汉 . 国槐苯丙氨酸解氨酶基因的克隆、反义表达载体构建及遗传转化. 林业科学研究, 2008, 21(5): 611-618.
[2]	汪阳东 , 李春秀 , 齐力旺 , 张守攻 . 中间锦鸡儿fad2基因片段克隆、反义表达载体构建及遗传转化初步研究. 林业科学研究, 2007, 20(1): 6-9.
[3]	刘会超 , 刘孟刚 , 郭丽娟 , 贾文庆 . 农杆菌介导的SeNHX1基因转化月季愈伤组织的研究. 林业科学研究, 2010, 23(4): 617-621.
[4]	余义勋 , 包满珠 , 孙振元 . 香石竹ACC氧化酶重复基因植物表达载体的构建及转基因植株的获得. 林业科学研究, 2004, 17(1): 1-5.
[5]	张冰玉 , 苏晓华 , 李义良 , 张永安 , 曲良建 , 王玉珠 , 田颖川 . 转双价抗蛀干害虫基因杨树的获得及其抗虫性鉴定. 林业科学研究, 2005, 18(3): 364-368.
[6]	林荣呈 , 陈龙清 , 包满珠 , 孙振元 . 提高根癌农杆菌介导的香石竹遗传转化效率的研究. 林业科学研究, 2003, 16(2): 123-128.
[7]	王民炎 , 俞文仙 , 赵耘霄 , 陈益存 , 高暝 , 吴立文 , 吴善群 , 汪阳东 . 农杆菌介导的山苍子遗传转化体系的构建. 林业科学研究, 2022, 35(5): 71-80. doi: 10.13275/j.cnki.lykxyj.2022.005.008
[8]	张俊卫 , 包满珠 , 孙振元 . 草坪草的遗传转化研究进展. 林业科学研究, 2003, 16(1): 87-94.
[9]	王曦茁 , 汪来发 , 曹业凡 , 胡坚 , 汪祥 , 覃艳 , 王永春 . 以beta-tubulin基因为选择标记的淡紫紫孢菌遗传转化. 林业科学研究, 2023, 36(4): 12-19. doi: 10.12403/j.1001-1498.20230056
[10]	吴晓娟 , 鲁俊倩 , 常英英 , 钟姗辰 , 苏晓华 , 张冰玉 . AtMET1基因在84K杨中的遗传转化及诱导表达分析. 林业科学研究, 2020, 33(3): 63-69. doi: 10.13275/j.cnki.lykxyj.2020.03.008
[11]	陈颖 , 李铃 , 韩一凡 . 抗菌肽LcI基因转化杨树的阶段研究. 林业科学研究, 1996, 9(6): 646-649.
[12]	郭飞龙 , 卢孟柱 , 徐刚标 , 叶天文 , 敖小平 . 胡杨基因组片段转化拟南芥表型研究. 林业科学研究, 2018, 31(4): 18-22. doi: 10.13275/j.cnki.lykxyj.2018.04.003
[13]	谢丽华 , 蒋晶 , 刘明英 , 乔桂荣 , 邱文敏 , 杨惠琴 , 卓仁英 . ptc-miR213的人工microRNA植物表达载体的构建及遗传转化. 林业科学研究, 2013, 26(1): 29-33.
[14]	张学利 , 杨树军 , 张百习 , 白雪峰 . 不同感病等级樟子松根际与非根际土壤性质对比研究. 林业科学研究, 2006, 19(1): 88-92.
[15]	尹立伟 , 池玉杰 . 猴头菌锰过氧化物酶1基因在构巢曲霉的异源转化与表达. 林业科学研究, 2013, 26(4): 480-487.
[16]	蔡琼 , 丁贵杰 , 文晓鹏 . 马尾松谷胱甘肽过氧化物酶PmGPX6基因cDNA克隆及转化拟南芥耐旱性初步研究. 林业科学研究, 2016, 29(6): 839-846.
[17]	花晓梅 , 刘国龙 , 张效林 , 余良富 , 曾平生 , 黄冬青 . 松树截根菌根化育苗和造林的研究*. 林业科学研究, 1995, 8(5): 535-543.
[18]	顾小平 , 吴晓丽 , 汪阳东 . 几种丛生竹根际联合固氮研究. 林业科学研究, 2001, 14(1): 28-34.
[19]	秦国峰 . 马尾松诱根嫁接技术研究. 林业科学研究, 1989, 2(6): 552-557.
[20]	顾小平 , 吴晓丽 . 毛竹及浙江淡竹根际联合固氮的研究*. 林业科学研究, 1994, 7(6): 618-623.