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矿山型东南景天cDNA表达文库构建与耐镉基因筛选

刘明英 乔桂荣 蒋晶 邱文敏 卓仁英

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矿山型东南景天cDNA表达文库构建与耐镉基因筛选

  • 基金项目:

    中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目"灰绿曲霉极端耐盐突变体的抗性基因发掘"(RISF6155)

  • 中图分类号: S718.46

Construction of Stress Induced Full Length cDNA Library of Sedum alfredii and Isolation of Genes Related to Cd-tolerance

  • CLC number: S718.46

  • 摘要: 以筛选出的镉超积累矿山型东南景天为材料,经镉胁迫后提取总RNA,纯化mRNA,利用改良SMART技术合成了全长cDNA,回收500 bp以上cDNA大片段克隆到改造过的大肠杆菌/酵母穿梭载体pYES2.0G中,建成东南景天镉全长cDNA文库,对随机挑取的阳性克隆进行PCR鉴定,插入片断大小在1 000 bp左右,说明所构建的文库达到了用于目的基因分离筛选和表达的建库要求,为将来筛选克隆与东南景天抗重金属相关基因奠定了基础。
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出版历程
  • 收稿日期:  2011-10-11
  • 刊出日期:  2012-06-13

矿山型东南景天cDNA表达文库构建与耐镉基因筛选

  • 1. 中国林业科学研究院亚热带林业研究所,浙江 富阳 311400
  • 2. 林木遗传育种国家重点实验室,北京 100091
基金项目:  中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目"灰绿曲霉极端耐盐突变体的抗性基因发掘"(RISF6155)

摘要: 以筛选出的镉超积累矿山型东南景天为材料,经镉胁迫后提取总RNA,纯化mRNA,利用改良SMART技术合成了全长cDNA,回收500 bp以上cDNA大片段克隆到改造过的大肠杆菌/酵母穿梭载体pYES2.0G中,建成东南景天镉全长cDNA文库,对随机挑取的阳性克隆进行PCR鉴定,插入片断大小在1 000 bp左右,说明所构建的文库达到了用于目的基因分离筛选和表达的建库要求,为将来筛选克隆与东南景天抗重金属相关基因奠定了基础。

English Abstract

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