诱导和非诱导条件下喙尾琵甲幼虫抗菌肽分离及抑菌活性比较

孙龙; 冯颖; 何钊; 陈智勇; 赵敏; 和锐

诱导和非诱导条件下喙尾琵甲幼虫抗菌肽分离及抑菌活性比较

1.
中国林业科学研究院资源昆虫研究所,国家林业局资源昆虫培育与利用重点实验室,云南昆明 650224
基金项目:
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项项目(RIRICAF2011001M);国家林业局引进国际先进林业科学技术项目(20064116)
中图分类号: S789

Isolation and Comparison of Inhibitory Effect of Antimicrobial Peptides from Blaps rhynchoptera Larvae under Induced and Non-induced Conditions

1.
Research Institute of Resources Insects, Chinese Academy of Forestry, Key Laboratory of Cultivation and Utilization of Resource Insects, State Forestry Administration, Kunming 650224, Yunnan, China
CLC number: S789

摘要: 对混合菌液诱导和非诱导处理的喙尾琵甲幼虫抗菌肽进行了分离纯化及抑菌活性比较。结果显示:诱导组和非诱导组粗提物无抑菌活性,但是经凝胶色谱分离后,从非诱导组获得组分DZP1,对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌表现出抑制作用;从诱导组获得组分YDP1,对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、绿脓杆菌具有活性,且YDP1活性明显强于DZP1;Tricine-SDS-PAGE检测表明DZP1和YDP1组成、种类基本一致,主要由20 kD以下分子量的小肽组成。研究结果表明:喙尾琵甲幼虫在诱导和非诱导条件下均可分离到具有抑菌活性的抗菌肽,菌液诱导可增强抗菌肽的活性和抑菌谱。
- 喙尾琵甲
- / 抗菌肽
- / 诱导
- / 抑菌活性
Abstract: Antimicrobial peptide which plays a key role in the innate immune system of insect, is a kind of cationic alkaline peptide with low molecule weight. It is so effective against bacteria that it can be expected to develop as a new antibiotic. In this study, the authors compared the inhibitory effect of antimicrobial peptides of Blaps rhynchoptera Fairmaire larvae at induced treatment with non-induced treatment during isolation and purification procedures. The result indicated that both crude extracts of the two groups had no inhibitory effect on indicator bacteria at first. But after gel chromatography, the fraction DZP1 from non-induced group showed anti-bacteria activities against Staphylococcus aureus and Bacillus subtilis. Meanwhile the fraction YDP1 from induced group displayed anti-bacteria activities against Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis and Pseudomonas aeruginosa. Moreover, YDP1 had stronger activity than DZP1 and its anti-bacteria spectrum was broadened. Based on the analysis of Tricine-SDS-PAGE, the components of DZP1 and YDP1 were similar, both composed of small peptides no less than 20 kD. The results suggested that the antimicrobial peptide could be obtained from both induced and non-induced insects and the inhibitory effect against microbes would be stronger after challenging with bacteria.
- Blaps rhynchoptera
- / antimicrobial peptide
- / induced
- / inhibitory effect

[1]	Zasloff M. Antimicrobial peptides of multicellular organisms[J]. Nature, 2002,415(6870):389-395
[2]	Bulet P, Hetru C, Dimarcq J L, et al. Antimicrobial peptides in insects; structure and function[J]. Dev Comp Immunol, 1999,23(4-5):329-344
[3]	Hancock R E, Lehrer R. Cationic peptides: a new source of antibiotics[J]. Trends Biotechnol, 1998,16(2):82-88
[4]	吴甜甜, 杨洁. 天然抗菌肽的研究进展及应用前景[J]. 生物技术通报, 2009(1):27-30
[5]	Bulet P, Stocklin R. Insect antimicrobial peptides: structures, properties and gene regulation[J]. Protein Pept Lett, 2005,12(1):3-11
[6]	Huang L, Cheng T, Xu P, et al. A genome-wide survey for host response of silkworm, Bombyx mori during pathogen Bacillus bombyseptieus infection[J]. Plos One, 2009,4(12):e8098
[7]	Haine E R, Moret Y, Siva-Jothy M T, et al. Antimicrobial defense and persistent infection in insects[J]. Science, 2008,322(5905):1257-1259
[8]	Nguyen L T, Haney E F, Vogel H J. The expanding scope of antimicrobial peptide structures and their modes of action[J]. Trends in Biotechnology, 2011,29(9):464-472
[9]	张兰胜, 夏从龙, 杨永寿, 等. 彝药喙尾琵琶甲的研究进展[J]. 时珍国医国药, 2009,20(12):3113-3114
[10]	赵敏, 陈晓鸣, 孙龙, 等. 云南省喙尾琵琶甲分布及生态环境调查[J]. 林业科学研究, 2007,20(3):356-362
[11]	施贵荣, 肖培云, 洪小凤, 等. 喙尾琵琶甲提取物体外抗菌作用初步研究[J]. 时珍国医国药, 2011,22(3):622-623
[12]	施贵荣, 庄孝龙, 孙会仙, 等. 喙尾琵琶甲抗菌活性的研究[J]. 大理学院学报:综合版, 2010,9(12):18-19
[13]	李蕾, 罗氚芸, 等. 云南琵琶甲抗菌活性成分研究[J]. 中草药, 2001,32(3):197-199
[14]	刘勇, 罗氚芸, 李蕾, 等. 云南琵琶甲防御性分泌物抗菌活性及GC-MS分析[J]. 云南大学学报:自然科学版, 2000,22(3):217-219
[15]	罗氚芸, 刘勇. 云南琵琶甲脂溶性抗菌活性成分的研究[J]. 中草药, 1999,30(8):566-567
[16]	罗建蓉, 何江波, 张桢, 等. 药用昆虫喙尾琵琶甲化学成分研究[J]. 中成药, 2010(11):2013-2014
[17]	罗氚芸, 刘勇. 云南民间药用琵琶甲无机元素及氨基酸分析[J]. 氨基酸和生物资源, 1999,21(3):38-40
[18]	郭宝华, 何钊, 冯颖, 等. 三种昆虫甲壳素提取与分析[J]. 林业科学研究, 2008,21(4):561-565
[19]	张建社, 褚武英, 陈韬. 蛋白质分离与纯化技术[M]. 北京: 军事医学科学出版社, 2009
[20]	Schägger H. Tricine-SDS-PAGE[J]. Nature Protocols, 2006,1(1):16-22
[21]	叶英妩, 王毓三, 申子瑜. 全国临床检验操作规程[M]. 第3版. 南京: 东南大学出版社, 2006
[22]	Yang W, Cheng T, Ye M, et al. Functional divergence among silkworm antimicrobial peptide paralogs by the activities of recombinant proteins and the induced expression profiles[J]. Plos One, 2011,6(3):e18109
[23]	Hetru C, Troxler L, Hoffmann J A. Drosophila melanogaster antimicrobial defense[J]. J Infect Dis, 2003,187(Suppl 2):S327-S334
[24]	Dang X L, Wang Y S, Huang Y D, et al. Purification and characterization of an antimicrobial peptide, insect defensin, from immunized house fly (Diptera: Muscidae)[J]. J Med Entomol, 2010,47(6):1141-1145
[25]	Cho W L, Fu Y C, Chen C C, et al. Cloning and characterization of cDNAs encoding the antibacterial peptide, defensin A, from the mosquito, Aedes aegypti[J]. Insect Biochemistry and Molecular Biology, 1996,26(4):395-402
[26]	Hancock R E, Sahl H G. Antimicrobial and host-defense peptides as new anti-infective therapeutic strategies[J]. Nat Biotechnol, 2006,24(12):1551-1557
[27]	Fields G B. Peptide characterization and application protocols[M]. Totowa, N J.: Humana, 2007
[28]	许兵红, 董卫华, 陈萍, 等. 家蝇抗菌物质诱导及高温处理后的抑菌活性[J]. 中国媒介生物学及控制杂志, 2009,20(3):201-205
[29]	陶淑霞, 韩静菲, 李玉. 诱导源及其诱导剂量对黄粉虫幼虫血淋巴抗菌活性的影响[J]. 吉林农业大学学报, 2010,32(2):145-148

[1]	冀焕红 , 冯颖 , 赵敏 , 陈智勇 , 陈晓鸣 , 叶寿德 . 环境因子对喙尾琵甲卵孵化的影响. 林业科学研究, 2010, 23(1): 38-43.
[2]	. 喙尾琵甲DNA提取方法比较与AFLP反应体系的建立. 林业科学研究, 2010, 23(2): 234-240.
[3]	王奎 , 冯颖 , 孙龙 , 何钊 , 陈智勇 . 美洲大蠊乙酸乙酯提取物的分离和抑菌活性分析. 林业科学研究, 2013, 26(2): 163-166.
[4]	易传辉 , 陈晓鸣 , 史军义 , 周成理 . 光周期和温度对美凤蝶滞育诱导的影响. 林业科学研究, 2007, 20(2): 188-192.
[5]	张彦妮 , 董亚茹 , 卓丽环 , 张远东 . 激素对复叶槭茎段和叶片愈伤组织诱导及再生的影响. 林业科学研究, 2012, 25(4): 516-520.
[6]	韩登媛 , 李旦 , 赵健 , 李慧 , 张金凤 . 华北落叶松胚性愈伤组织诱导影响因子的研究. 林业科学研究, 2013, 26(4): 454-458.
[7]	张方秋 . 棕榈藤组培技术研究*. 林业科学研究, 1993, 6(5): 486-492.
[8]	陈颖 , 李铃 , 韩一凡 . 抗菌肽LcI基因转化杨树的阶段研究. 林业科学研究, 1996, 9(6): 646-649.
[9]	佘新松 , 翟大才 , 胡宗浩 , 滕芸芸 , 朱雯培 , 李士壮 , 柏晓辉 . 无刺枸骨果实化学成分及其抗氧化和抑菌活性研究. 林业科学研究, 2020, 33(4): 135-142. doi: 10.13275/j.cnki.lykxyj.2020.04.017
[10]	冉隆贤 , 谷文众 , 吴光金 . 水杨酸诱导桉树抗青枯病的作用及相关酶活性变化. 林业科学研究, 2004, 17(1): 12-18.
[11]	赵敏 , 陈晓鸣 , 孙龙 , 冯颖 , 叶寿德 . 云南省喙尾琵琶甲分布及生态环境调查. 林业科学研究, 2007, 20(3): 356-362.
[12]	裘珍飞 , 曾炳山 , 李湘阳 , 刘英 . TDZ对巨尾桉(GL9)胚性愈伤组织诱导和再生的影响. 林业科学研究, 2009, 22(5): 740-743.
[13]	陈敏 , 卢孟柱 , 王敏杰 , 张志毅 . 具有光肩星天牛内切聚葡糖酶结合活性短肽的筛选. 林业科学研究, 2006, 19(3): 267-271.
[14]	杜建玲 , 项蔚华 , 沈瑞祥 . 诱导杨树抗溃疡病机理的研究. 林业科学研究, 1995, 8(1): 78-81.
[15]	曾炳山 , 许煌灿 , 刘英 , 尹光天 . 棕榈藤组培苗根的诱导研究. 林业科学研究, 1998, 11(3): 260-264.
[16]	杨至德 , 王雁 , 刘雪梅 , 缪崑 , 汤巧香 . 发根农杆菌诱导牡丹生根的初步研究. 林业科学研究, 2007, 20(2): 292-295.
[17]	裘珍飞 , 曾炳山 , 李湘阳 , 刘英 , 查志刚 . 4个桉树无性系愈伤诱导和分化. 林业科学研究, 2012, 25(4): 531-534.
[18]	梁立雄 , 常英英 , 高亚南 , 王颜波 , 张伟溪 , 苏晓华 , 张冰玉 . AtMET1基因克隆及化学诱导表达分析. 林业科学研究, 2016, 29(6): 946-950.
[19]	张铭 , 梁军 , 李箐 , 谢宪 , 程元 , 张星耀 . 森吉木霉M75发酵粗提液对松球壳孢菌的抑菌机制研究. 林业科学研究, 2021, 34(6): 149-156. doi: 10.13275/j.cnki.lykxyj.2021.06.018
[20]	范正琪 , 李纪元 , 田敏 . 抗生素对山茶愈伤组织诱导和生长的影响. 林业科学研究, 2005, 18(2): 183-186.

点击查看大图

计量

文章访问数: 3092
HTML全文浏览量: 178
PDF下载量: 68
被引次数: 0

姓名
邮箱
手机号码
标题
留言内容
验证码

留言板

诱导和非诱导条件下喙尾琵甲幼虫抗菌肽分离及抑菌活性比较

Isolation and Comparison of Inhibitory Effect of Antimicrobial Peptides from Blaps rhynchoptera Larvae under Induced and Non-induced Conditions

计量

诱导和非诱导条件下喙尾琵甲幼虫抗菌肽分离及抑菌活性比较

English Abstract

Isolation and Comparison of Inhibitory Effect of Antimicrobial Peptides from Blaps rhynchoptera Larvae under Induced and Non-induced Conditions

全文HTML

目录

留言板

诱导和非诱导条件下喙尾琵甲幼虫抗菌肽分离及抑菌活性比较

Isolation and Comparison of Inhibitory Effect of Antimicrobial Peptides from Blaps rhynchoptera Larvae under Induced and Non-induced Conditions

计量

出版历程

诱导和非诱导条件下喙尾琵甲幼虫抗菌肽分离及抑菌活性比较

English Abstract

Isolation and Comparison of Inhibitory Effect of Antimicrobial Peptides from Blaps rhynchoptera Larvae under Induced and Non-induced Conditions

全文HTML

目录