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毛竹微管蛋白基因PeTua3的原核表达及其 功能初步研究

李彩丽 彭镇华 高志民

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毛竹微管蛋白基因PeTua3的原核表达及其 功能初步研究

  • 基金项目:

    林业公益性行业科研专项"毛竹基因组测序研究"(200704001)

  • 中图分类号: S795.7

Prokaryotic Expression and Functional Analysis of Microtubule Gene PeTua3 from Phyllostachys edulis

  • CLC number: S795.7

  • 摘要: 作为细胞骨架的重要组成部分,微管蛋白在细胞壁发育过程中起着重要的调控作用。采用RT-PCR技术从毛竹叶片中克隆到一个微管蛋白(Tua3)同源基因的cDNA序列,长1 356 bp,编码451个氨基酸,命名为PeTua3。构建原核表达载体pET-32b-PeTua3,并将其转入大肠杆菌中诱导表达。蛋白电泳检测结果表明:温度和诱导时间对PeTua3基因蛋白的表达影响差异显著,其中,在37℃用0.4 mmol·L-1 IPTG诱导2 h的表达效果最好。用PeTua3基因体外表达的重组蛋白处理拟南芥种子,其幼苗上胚轴明显增粗,侧根增多;超薄切片显微观察显示,重组蛋白处理的拟南芥上胚轴和主根的薄壁细胞数量均增多,细胞体积变大,维管束增粗。
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出版历程
  • 收稿日期:  2012-07-10
  • 刊出日期:  2012-12-13

毛竹微管蛋白基因PeTua3的原核表达及其 功能初步研究

  • 1. 国际竹藤中心, 竹藤科学与技术重点实验室, 北京 100102
基金项目:  林业公益性行业科研专项"毛竹基因组测序研究"(200704001)

摘要: 作为细胞骨架的重要组成部分,微管蛋白在细胞壁发育过程中起着重要的调控作用。采用RT-PCR技术从毛竹叶片中克隆到一个微管蛋白(Tua3)同源基因的cDNA序列,长1 356 bp,编码451个氨基酸,命名为PeTua3。构建原核表达载体pET-32b-PeTua3,并将其转入大肠杆菌中诱导表达。蛋白电泳检测结果表明:温度和诱导时间对PeTua3基因蛋白的表达影响差异显著,其中,在37℃用0.4 mmol·L-1 IPTG诱导2 h的表达效果最好。用PeTua3基因体外表达的重组蛋白处理拟南芥种子,其幼苗上胚轴明显增粗,侧根增多;超薄切片显微观察显示,重组蛋白处理的拟南芥上胚轴和主根的薄壁细胞数量均增多,细胞体积变大,维管束增粗。

English Abstract

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